ST-2000A霉菌毒素測定儀是當(dāng)前、酶聯(lián)免疫等分析*的一種分析儀器。采用固相酶聯(lián)免疫吸附ELISA的原理，即酶聯(lián)免疫法，由本儀器與B1試劑盒二大件組成，能*、定量測定樣品中B1的含量(如配其他試劑盒，可測其他毒素)，廣泛應(yīng)用于糧食、食品、飼料、油脂、乳制品、藥物、飲料、酒等產(chǎn)品的B1及其他霉菌毒素的檢測。

性能特點：飼料油脂乳制品霉菌素測定儀糧油食品檢測飼料油脂乳制品霉菌素測定儀糧油食品檢測

1. 顯示操作：彩色液晶屏、可視話布板、顯示整板信息、觸摸屏操作

2、振板功能：3 級振板速度、時間 0-255 秒可調(diào)

3、工 作 站：專業(yè)的酶標(biāo)儀軟件，可存儲 500 組程序、100000 個 樣本結(jié)果，提供吸光度、線性方程、對數(shù)方程、二次方程、三次方程、吸光度百分比-濃度對數(shù)方程、樣條函數(shù)、抑制率等豐富的計算模式

技術(shù)參數(shù)：

光 源：DC12V  22W  進口鹵素?zé)?/span>

波長范圍：400-900nm

濾 光 片：標(biāo)配 405、450、492、630nm，其它波長可選配

讀數(shù)范圍：0-4.000Abs

分 辨 率：0.001Abs

示值誤差：≤±0.01Abs

穩(wěn) 定 性：≤±0.003Abs

重 復(fù) 性：≤0.3%

尺寸：400mm(L)*260mm(W)*200mm(H)      

1 原理及用途

本試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測谷物、飼料等樣品中的B1（Aflatoxin B1，AFB1），試劑盒由預(yù)包被偶聯(lián)抗原的酶標(biāo)板、辣根酶標(biāo)記物、抗體、標(biāo)準(zhǔn)品及其他配套試劑組成。檢測時，加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品溶液，樣本中的B1和酶標(biāo)板上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競爭抗B1抗體，加入酶標(biāo)記物后，用TMB底物顯色，樣本吸光度值與其所含B1含量成負相關(guān)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出樣本中

2 技術(shù)指標(biāo)

2.1 試劑盒靈敏度：0.03ppb(ng/ml)

2.2 反應(yīng)模式：25℃，30min～15min

2.3 檢測下限：

谷物……………………………………0.15ppb

配合飼料………………………………0.3ppb

食用油、花生…………………………0.6ppb

醬類、麥類等飼料……………………0.3ppb

啤酒……………………………………0.3ppb

葡萄酒、醬油、醋……………………0.15ppb

2.4 交叉反應(yīng)率：

B1…………………………100%

2.5 樣本回收率：

谷物及配合飼料……………………85%±15%

花生…………………………………82±15%

食用油………………………………85±15%

醬類、麥類等飼料………………83±15%

啤酒………………………………84±15%

葡萄酒、醬油、醋………………87±15%

3 試劑盒組成

酶標(biāo)板……………………………96孔

標(biāo)準(zhǔn)液（黑蓋）：各1ml

0ppb、0.03ppb、0.06ppb、0.12ppb、0.24ppb、0.48ppb

高標(biāo)準(zhǔn)液：100ppb…………………1ml

酶標(biāo)記物（紅蓋）…………………5.5ml

抗體工作液（藍蓋）………………5.5ml

底物液A（白蓋）……………………6ml

底物液B（黑蓋）……………………6ml

終止液（黃蓋）………………………6ml

20X濃縮洗滌液（白蓋）……………40ml

說明書………………………………1份

4 需要的器材和試劑

4.1 儀器：測定儀、打印機、均質(zhì)器 、氮氣吹干裝置、振蕩器、離心機、刻度移液管、天平（感量0.01g）

4.2 微量移液器：單道20µl-200µl，100µl-1000µl、多道300µl

4.3 試劑：甲醇、正己烷、或甲烷

5 樣本前處理

5.1 樣本處理前須知：

實驗器具必須潔凈并使用一次性吸頭，以避免污染干擾實驗結(jié)果。

5.2 配液：

配液1：樣品提取液

   70%甲醇，即V甲醇:V去離子水=7：3。

5.3 樣本前處理步驟：

5.3.1 谷物處理方法

1）稱取2g粉碎樣品于50ml離心管中，加5ml樣品提取液，振蕩5分鐘，室溫4000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘；

2）取0.5ml上清，加入0.5ml去離子水，混勻；

3）取50μl進行分析。

   樣本稀釋倍數(shù)：5    檢測下限：0.15ppb

5.3.2 玉米皮、麥麩等吸水性強的樣本處理方法

1）稱取2g粉碎樣品于50ml離心管中，加20ml樣品提取液，振蕩5分鐘，室溫4000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘；

2）取0.5ml上清，加入0.5ml去離子水，混勻；（對于毒素含量*的樣本可用35%的甲醇稀釋后再測。比如取2）中的混合液0.1ml加35%的甲醇0.9ml混勻，終樣本稀釋倍數(shù)為200，檢測下限為6ppb。）

3）取50μl進行分析。

樣本稀釋倍數(shù)：20    檢測下限：0.6ppb

注：由于毒素在樣本中的分布呈非均勻狀態(tài)，取樣時需多點取樣充分混勻后再取2g進行試驗。

5.3.3 配合飼料處理方法

1）稱取2g粉碎樣品于50ml離心管中，加10ml樣品提取液，振蕩5分鐘，室溫4000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘；

2）取0.5ml上清，加入0.5ml去離子水，混勻；

3）取50μl進行分析。

樣本稀釋倍數(shù)：10    檢測下限：0.3ppb

5.3.4 食用油、花生、高油脂的飼料處理方法

1）稱取2g粉碎樣品于50ml離心管中，加8ml正己烷和10ml樣品提取液，振蕩5分鐘，室溫4000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘；

2）去除上層液體，取0.5ml下層液體加入0.5ml去離子水，混勻，再取混勻液體0.5ml加入0.5ml 35%甲醇，振蕩30S；

3）取50μl進行分析。

樣本稀釋倍數(shù)：20    檢測下限：0.6ppb

5.3.5 醬類、麥類、餅干、糕點等食品或調(diào)料，以及飼料濃縮料等飼料處理方法

1）稱取2g粉碎樣品于50ml離心管中，加10ml樣品提取液，振蕩5分鐘，室溫4000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘；

2）取2ml上清，加入4ml），振蕩5分鐘，室溫4000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘；

3）轉(zhuǎn)移上層液體到另一容器中，下層液留置備用，向上層液中再加入4ml甲烷），充分振蕩混5分鐘，室溫4000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘；

4）去除上層液體，合并兩次的下層液體并充分混勻；

5）取合并后的下層液體2ml于50-60℃氮氣下吹干；

6）加入0.5ml樣品提取液充分溶解干燥物，再加入0.5ml去離子水混勻；

7）取50μl進行分析。

樣本稀釋倍數(shù)：10    檢測下限：0.3ppb

5.3.6 啤酒處理方法

1）將啤酒充分?jǐn)嚢瑁ㄈコ鼵O2），取2ml啤酒樣品，加入1ml蒸餾水，再加入7ml甲醇，振蕩5分鐘；

2）取混勻后的樣品液0.5ml加入0.5ml去離子水，混勻；

3）取50μl進行分析。

樣本稀釋倍數(shù)：10    檢測下限：0.3ppb

5.3.7 葡萄酒、醬油、醋處理方法

1）取2ml樣品，加入2ml蒸餾水，再加入10ml，振蕩5分鐘，室溫4000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘；

2）取下層液體1ml于50-60℃氮氣下吹干；

3）加入0.5ml樣品提取液充分溶解干燥物，再加入0.5ml去離子水，混勻；

5）取50μl進行分析。

樣本稀釋倍數(shù)：5    檢測下限：0.15ppb

6 酶聯(lián)免疫試驗步驟

將所需試劑從4℃冷藏環(huán)境中取出，置于室溫平衡30min以上, 洗滌液冷藏時可能會有結(jié)晶需恢復(fù)到室溫以充分溶解，每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數(shù)量的微孔板及框架，將不用的微孔板放入自封袋，保存于2-8℃。

實驗開始前，用去離子水將20×濃縮洗滌液按20倍稀釋成工作洗滌液。

6.1 編    號：將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)微孔按序編號，每個樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行，并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。

6.2 加樣反應(yīng)：加標(biāo)準(zhǔn)品或樣本50µl/孔到各自的微孔中，然后加酶標(biāo)記物50µl/孔，再加入50µl/孔的抗體工作液，用蓋板膜封板，輕輕振蕩5秒混勻，25℃反應(yīng)30分鐘。

6.3 洗    滌：小心揭開蓋板膜，將孔內(nèi)液體甩干，用工作洗滌液250µl/孔充分洗滌5次，每次間隔30秒，用吸水紙拍干（拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破）。

6.4 顯    色：每孔加入底物液A 50µl，再加底物液B 50µl，輕輕振蕩5秒混勻，25℃避光顯色15分鐘。

6.5 終    止：每孔加入終止液50µl，輕輕振蕩混勻，終止反應(yīng)。

6.6 測吸光值：用測定儀于450nm處測定每孔吸光度值（建議用雙波長450/630nm）。測定應(yīng)在終止反應(yīng)后10分鐘內(nèi)完成

6.7 ST-2000A自動測定儀自動完成測定，自動出結(jié)果。